Абсолютная молекулярная масса и размер молекул
Абсолютная молекулярная масса
Молекулярная масса белков, синтетических и природных полимеров указывает непосредственно на эффективность и функциональность продукции.
Знание этого и других молекулярных параметров является ключевым фактором для контроля эффективности продукции в различных областях применения, которые учитывают следующие характеристики:
- Прочность, долговечность и твердость пластмасс и других синтетических полимеров.
- Деградация и степень высвобождения полимеров, доставляющих лекарственное вещество.
- Эффективность и вкус полисахаридов, входящих в состав пищевых продуктов (например, мальтодекстрин и другие производные крахмала).
- Прочность и качество наполнителей и смазочных материалов в фармацевтических и косметических средствах (например, гиалуроновая кислота и производные целлюлозы).
- Эффективность и состояние агрегации белков биофармацевтических препаратов (например, моноклональные антитела (mAb)).
Современные детекторы GPC / SEC от компании Bettersizer , реализуют много угловые (SEC-MALS), малоугловое и 90-градусный светорассеяние (LALS и RALS), предназначенные для высокоточных измерений абсолютной молекулярной массы. Комплексные системы, например TDAmax, представляют собой уже готовые решения, однако дополнительные детекторы, такие как SEC-MALS 20 и Bettersizer, позволяют усовершенствовать имеющиеся системы GPC / SEC для измерений абсолютной молекулярной массы.
Размер молекул
Размер или гидродинамический радиус RH определяют двумя методами: Оборудование на основе динамического рассеяния света (DLS), который применяется для определения среднего значения размера молекул в образце, также может использоваться в качестве детектора хроматографической системы.
Очень точный способ получения RH для всех составляющих образца – анализ на хроматографической системе с тремя детекторами после предварительного разделения на колонках SEC.
Использование вискозиметрического детектора и детектора светорассеяния позволяет определить молекулярную массу и характеристическую вязкость полимера или белка, а также рассчитать RH в любой точке хроматограммы
Преимущество использования обеих технологий – отсутствие верхнего и нижнего размерных границ для исследуемых образцов.
Размер молекул очень важный параметр во многих областях:
- Сравнение с молекулярной массой позволяет охарактеризовать структуру
- Метод динамического рассеяния света позволяет превратить размер молекулы в молекулярную массу
- Быстрый скрининг белков для определения степени их гомогенности
- Определение температуры плавления белков.
Системы Bettersizer обеспечивают два фундаментальных способа определения в растворе молекулярной массы полимеров и белков.
Измерение молекулярной массы методом статического рассеяния света (SLS)
Этим методом измеряют общее количество света, рассеянного образцом, с помощью чувствительного детектора под определенным углом рассеивания.
Калибровка не требуется, результатом является абсолютное значение.
Детекторы для ГПХ (GPC / SEC) позволяют получить данные о настоящем молекулярно-массовое распределение.
Для определения средневзвешенной молекулярной массы можно использовать кюветно систему, например Bettersizer .
Измерение молекулярной массы методом динамического рассеяния света (DLS)
Эта технология измеряет размер молекулы и преобразует его в расчетную молекулярную массу в соответствии с выбранной модели, например белков, дендримеров или линейных полимеров.
Для измерения нужно очень малый объем образца – всего 2 мкл.
Измерения выполняются очень быстро – всего пару минут на одно измерение.
По полученным данным можно рассчитать молекулярно-массовое распределение, хотя разделение олигомеров, например мономер – димер – триммер, невозможно.
